創(chuàng)新藥物靶點發(fā)現(xiàn)Innovative drug target discovery
技術(shù)平臺
化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在藥物靶點發(fā)現(xiàn)中迅速發(fā)展，尤其是基于化學(xué)探針的平臺。該技術(shù)已成功應(yīng)用于化學(xué)小分子藥物、天然產(chǎn)物、已批準老藥及內(nèi)源性代謝物。然而，開發(fā)化學(xué)探針面臨著諸如合成復(fù)雜、產(chǎn)率低、成本高及藥物分子SAR（Structure-Activity Relationship) 不明，這些因素極大地限制了靶點發(fā)現(xiàn)和機制解析。
基于光親和磁珠的藥物靶點發(fā)現(xiàn)平臺通過光照將活性藥物分子固定在功能性磁珠上，避免了化學(xué)探針的設(shè)計和合成，同時減少藥物結(jié)構(gòu)變化，保證藥物分子與靶點蛋白質(zhì)之間的特異性結(jié)合。固載有活性藥物分子的磁珠與蛋白質(zhì)組孵育后，可富集和分離藥物靶點蛋白質(zhì)，用于免疫印記和質(zhì)譜分析。
平臺特點
案例展示
為驗證staurosporine（Stau）的靶點，我們將其固定于光親和修飾的功能性磁珠表面（以下簡稱Stau-beads）。隨后將Stau-beads與全蛋白質(zhì)組孵育，F(xiàn)moc-beads作為對照組。
所得WB結(jié)果如下圖所示，Stau-beads能有效富集目的蛋白FECH（已知陽性靶點）。
接下來，我們將Fmoc-beads和stau-beads富集分離的蛋白質(zhì)進行酶切，質(zhì)譜檢測，定量比較實驗組與對照組中蛋白質(zhì)的強度差異。結(jié)果表明，所有已知的陽性靶點蛋白質(zhì)均在Stau-beads組中被顯著性富集，證實了方法的有效性。
