Chomix試劑盒
產(chǎn)品系列二：光親和探針
許多活性小分子化合物，例如生物體代謝物，天然產(chǎn)物和藥物分子，都是以非共價(jià)的方式和靶點(diǎn)蛋白質(zhì)發(fā)生動(dòng)態(tài)可逆相互作用，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)在體外研究過(guò)程中一旦失活，則會(huì)破壞二者之間的結(jié)合力。在小分子化合物靶點(diǎn)鑒定，細(xì)胞分布成像和蛋白質(zhì)標(biāo)記等領(lǐng)域，光親和標(biāo)記技術(shù)（Photoaffinity labeling, PAL）應(yīng)用廣泛，它是一種共價(jià)捕獲小分子-生物大分子相互作用的常用方法，在外界紫外光刺激的條件下，化學(xué)探針上的光交聯(lián)基團(tuán)（分類和特點(diǎn)見(jiàn)下表）能夠產(chǎn)生自由基、氮賓或卡賓，從而能夠快速共價(jià)標(biāo)記空間上鄰近的生物大分子。
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光交聯(lián)基團(tuán)
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光照波長(zhǎng)
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活性中間體
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優(yōu)點(diǎn)
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缺點(diǎn)
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苯甲酮 （Benzophenones） |
350-360 nm |
自由基 |
a) 商業(yè)易得； b) 光照波長(zhǎng)不會(huì)造成生物性損傷 |
a) 化學(xué)結(jié)構(gòu)較大； b) 光照時(shí)間長(zhǎng) |
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疊氮苯 （Aryl Azides） |
＜300 nm |
氮賓 |
a) 易合成； b) 化學(xué)結(jié)構(gòu)小 |
a) 光照波長(zhǎng)較短，可能會(huì)造成生物大分子的損傷； b) 易出現(xiàn)非特異性交聯(lián) |
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雙吖丙啶 （Diazirines） |
350-380 nm |
卡賓 |
a) 反應(yīng)速率快； b) 化學(xué)結(jié)構(gòu)??； c) 光照波長(zhǎng)不會(huì)造成生物性損傷 |
a) 合成繁瑣； b) 可異構(gòu)化生成重氮中間體 |
其中，雙吖丙啶結(jié)構(gòu)以其生物兼容性強(qiáng)，化學(xué)結(jié)構(gòu)小，反應(yīng)速度快等特點(diǎn)，在小分子光親和生物正交探針中應(yīng)用最為廣泛，科學(xué)家們相繼開(kāi)發(fā)了帶有不同衍生化官能團(tuán)（氨基、羧基或碘）的光交聯(lián)連接子，光交聯(lián)基團(tuán)用于捕獲生物大分子，生物正交基團(tuán)（例如炔基）作為報(bào)告基團(tuán)，能夠后續(xù)偶聯(lián)熒光素和生物素，用于蛋白質(zhì)信號(hào)檢測(cè)或富集分離。同時(shí)，新型高反應(yīng)活性的光交聯(lián)連接子也在持續(xù)開(kāi)發(fā)中。
將光交聯(lián)連接子與活性小分子偶聯(lián)，即產(chǎn)生具有生物活性的光親和生物正交探針，相比于傳統(tǒng)的生物素基團(tuán)修飾改造，光交聯(lián)連接子體積小，對(duì)活性小分子結(jié)構(gòu)，細(xì)胞穿膜能力等改動(dòng)均較小，結(jié)合長(zhǎng)波長(zhǎng)紫外光照條件，非常適合在活細(xì)胞中直接結(jié)合并共價(jià)捕獲結(jié)合蛋白，廣泛應(yīng)用于活性小分子靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)，脫靶蛋白鑒定和分布成像。
代表性產(chǎn)品如下（部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，可定制合成多種化學(xué)探針）：
